วันพุธที่ 10 มิถุนายน พ.ศ. 2569

Microbiology: Gram-Negative Bacilli overview

Microbiology: Gram-Negative Bacilli overview

หลังจากเข้าใจ Gram-positive cocci แล้ว กลุ่มที่สำคัญที่สุดถัดมาคือ

Gram-negative bacilli (GNB)

กลุ่มนี้เป็นสาเหตุหลักของ

  • UTI
  • Pyelonephritis
  • Cholangitis
  • Intra-abdominal infection
  • Hospital-acquired pneumonia
  • Sepsis
  • Septic shock

ในเวชปฏิบัติจริง หากเจอผู้ป่วย septic shock จำนวนมาก สุดท้ายมักพบว่าต้นเหตุคือ Gram-negative bacilli


Concept สำคัญที่สุด

ถ้าให้จำเพียงประโยคเดียว

Gram-negative bacilli = เชื้อจากลำไส้และสิ่งแวดล้อมที่สามารถเข้าสู่กระแสเลือดและทำให้ septic shock ได้


จุดเด่นของ Gram-negative bacteria

ผนังเซลล์มี

Outer membrane

     

LPS

     

Endotoxin

LPS (lipopolysaccharide)

โดยเฉพาะ

Lipid A

กระตุ้น

  • TNF-α
  • IL-1
  • IL-6

ทำให้เกิด

  • Fever
  • Vasodilation
  • Capillary leak
  • Septic shock

วิธีคิดเวลาเจอ Gram-negative bacilli

ให้ถาม 3 ข้อ

มาจากไหน ?

ก่อโรคที่ไหน ?

ดื้อยาหรือไม่ ?


แบ่งเป็น 2 กลุ่มใหญ่

Enteric Gram-negative bacilli

มาจากลำไส้

เช่น

  • E. coli
  • Klebsiella
  • Enterobacter
  • Proteus

Non-enteric Gram-negative bacilli

มาจากสิ่งแวดล้อม

เช่น

  • Pseudomonas
  • Acinetobacter

E. coli

เชื้อที่สำคัญที่สุดในมนุษย์

เป็น normal flora ของ colon

ทุกคนมี


E. coli เปรียบเสมือน

"เชื้อประจำบ้านที่หลุดออกจากบ้าน"


ปกติอยู่ในลำไส้

แต่เมื่อหลุดไปผิดที่

จะก่อโรค


โรคสำคัญ

UTI

พบบ่อยที่สุด

Colon

 

Perineum

 

Urethra

 

Bladder

สาเหตุ UTI มากกว่า 70-80%


Pyelonephritis

Bacteremia

Cholangitis

Peritonitis

Neonatal meningitis


Virulence factors ของ E. coli

Adhesin (fimbriae)

ช่วยเกาะ urothelium

จึงก่อ UTI ได้ดี


Capsule

ช่วยหนี immune system


Endotoxin

ก่อ sepsis


Clinical pearl

UTI

คิด E. coli ก่อนเสมอ

จนกว่าจะพิสูจน์ว่าไม่ใช่


Klebsiella

เชื้อในตระกูลเดียวกับ E. coli

แต่มีอาวุธสำคัญกว่า


จุดเด่น

Capsule หนามาก

Klebsiella

    

Large capsule

    

Mucoid colony


โรคสำคัญ

Pneumonia

คลาสสิก

  • Alcoholism
  • Diabetes
  • Debilitated host

Liver abscess

โดยเฉพาะในเอเชีย

พบมากขึ้นเรื่อย ๆ


UTI

Bacteremia


Hypervirulent Klebsiella

โดยเฉพาะ

Klebsiella pneumoniae

สายพันธุ์

  • K1
  • K2

ก่อ

Liver abscess

 

Eye

 

Endophthalmitis

 

Brain

 

Meningitis

ได้แม้ในคนปกติ


Clinical pearl

ผู้ป่วยเบาหวาน

  •  

Liver abscess

ให้คิดถึง Klebsiella

เสมอ


ESBL คืออะไร

ปัญหาใหญ่ของ

  • E. coli
  • Klebsiella

สร้างเอนไซม์

Extended-spectrum β-lactamase

ทำลาย

  • Penicillin
  • Cephalosporin หลายชนิด

ดังนั้น

E. coli

Klebsiella

 

 

ESBL

 

 

ดื้อยา

เป็นปัญหาสำคัญทั่วโลก


Pseudomonas aeruginosa

เชื้อตัวนี้ต่างจาก E. coli และ Klebsiella

อย่างชัดเจน


Habitat

ไม่ได้อยู่ในลำไส้เป็นหลัก

แต่อยู่ใน

  • น้ำ
  • ดิน
  • เครื่องมือแพทย์
  • Ventilator
  • Sink

ดังนั้น

Pseudomonas

=

Environmental pathogen


บุคลิกของ Pseudomonas

ถ้า E. coli คือโจรในบ้าน

Pseudomonas คือ

"นักรบพิเศษในโรงพยาบาล"


ชอบก่อโรคใน

ICU

Ventilator

Catheter

Burn wound

Neutropenia


โรคสำคัญ

Hospital-acquired pneumonia

Ventilator-associated pneumonia

Catheter infection

Bacteremia

Burn infection

Malignant otitis externa


Virulence factors

Biofilm

เกาะอุปกรณ์แพทย์ได้ดี


Exotoxin A

ยับยั้ง protein synthesis

คล้าย diphtheria toxin


Elastase

ทำลายเนื้อเยื่อ


ทำไมแพทย์กลัว Pseudomonas

เพราะ

ดื้อยาเก่งมาก

มีทั้ง

  • Efflux pump
  • β-lactamase
  • Biofilm
  • Mutation

ดังนั้น

Pseudomonas

=

หนึ่งในเชื้อดื้อยาที่สำคัญที่สุดในโรงพยาบาล


เปรียบเทียบ 3 ตัวหลัก

Feature

E. coli

Klebsiella

Pseudomonas

Habitat

Colon

Colon

Environment

UTI

++++

++

+

Pneumonia

+

+++

+++

Liver abscess

+

++++

-

Septic shock

+++

+++

+++

Capsule

+

++++

+

Biofilm

+

+

++++

Drug resistance

ESBL

ESBL

Extreme


Clinical Approach

Community-acquired UTI

คิด

E. coli

ก่อน


Diabetic liver abscess

คิด

Klebsiella

ก่อน


ICU pneumonia

คิด

Pseudomonas

ก่อน


Septic shock จาก abdominal source

คิด

E. coli

Klebsiella

ก่อน


Pathogenesis ของ Gram-negative bacilli

ภาพรวมทั้งหมด

Colonization

     

Barrier breakdown

     

Local infection

     

Bacteremia

     

LPS release

     

Cytokine storm

     

Septic shock

นี่คือกลไกสำคัญของผู้ป่วย sepsis ที่พบในห้องฉุกเฉินและ ICU


Framework ที่ควรจำ

ให้มองเป็น 3 บุคลิก

E. coli

=

เจ้าถิ่นในลำไส้

(UTI specialist)

 

Klebsiella

=

เจ้าถิ่นมีเกราะหนา

(Capsule specialist)

 

Pseudomonas

=

นักรบโรงพยาบาล

(MDR specialist)


Mind Map สรุป

Gram-negative bacilli

├── Enteric bacteria

    

     ├── E. coli

          ├─ UTI

          ├─ Pyelonephritis

          └─ Sepsis

    

     └── Klebsiella

           ├─ Capsule

           ├─ Pneumonia

           ├─ Liver abscess

           └─ ESBL

└── Environmental bacteria

     

      └── Pseudomonas

            ├─ ICU infection

            ├─ VAP

            ├─ Burn infection

            ├─ Biofilm

            └─ MDR

หากมองในระดับ Pathogenesis จะสรุปได้ง่าย ๆ ว่า

  • E. coli = เชื้อประจำลำไส้ที่ชอบก่อ UTI และ sepsis
  • Klebsiella = เชื้อลำไส้ที่มี capsule หนา ก่อ pneumonia และ liver abscess เด่น
  • Pseudomonas = เชื้อสิ่งแวดล้อมที่ฉวยโอกาสในโรงพยาบาลและดื้อยาเก่งมาก

สามตัวนี้เป็น "แกนหลัก" ของ Gram-negative bacilli ที่นักศึกษาแพทย์ควรเข้าใจก่อนเรียน Enterobacterales และเชื้อดื้อยาในระดับลึกต่อไป.

วันอังคารที่ 9 มิถุนายน พ.ศ. 2569

Microbiology: Gram-Negative Cocci overview

Microbiology: Gram-Negative Cocci overview

เมื่อเรียน Gram-positive cocci และ Gram-negative bacilli แล้ว จะพบว่ากลุ่ม

Gram-negative cocci (GNC)

มีจำนวนเชื้อไม่มาก แต่มีความสำคัญทางคลินิกสูงมาก

โดยเฉพาะ

  • Meningitis
  • Gonorrhea
  • Septic arthritis
  • Fulminant sepsis

Concept สำคัญที่สุด

ถ้าจำเพียงประโยคเดียว

Gram-negative cocci = Neisseria

ในเวชปฏิบัติจริง

เมื่อเห็น Gram-negative diplococci

ให้คิดถึง

Neisseria meningitidis

Neisseria gonorrhoeae

ก่อนเสมอ


Gram-negative cocci มีอะไรบ้าง

ที่สำคัญทางการแพทย์มีเพียงไม่กี่ชนิด

Neisseria meningitidis

Neisseria gonorrhoeae

Moraxella catarrhalis

แต่สองตัวแรกสำคัญที่สุด


ลักษณะทางจุลชีววิทยา

รูปร่าง

เป็น diplococci

ลักษณะเหมือนเมล็ดกาแฟ 2 เมล็ดประกบกัน

( )

( )

หรือ

>< 


ชอบอยู่บน mucosal surface

เชื้อกลุ่มนี้ไม่ชอบผิวหนัง

ไม่ชอบลำไส้

แต่ชอบ

  • Nasopharynx
  • Oropharynx
  • Genital tract

วิธีคิด Pathogenesis

เชื้อกลุ่มนี้เป็น

"Mucosal pathogens"

เริ่มจาก

Colonization

     

Mucosal invasion

     

Bloodstream invasion

     

Disease


Genus Neisseria

แบ่งง่าย ๆ

Neisseria

     

      ├── N. meningitidis

     

      └── N. gonorrhoeae


Neisseria meningitidis

(Meningococcus)


Habitat

อยู่ใน

  • Nasopharynx

ของคนปกติ

ประมาณ 5-20%

อาจมีเชื้ออยู่โดยไม่ป่วย


การติดต่อ

ผ่าน

  • Respiratory droplets
  • Close contact

Pathogenesis

เริ่มจาก

Nasopharynx

     

Bloodstream

     

Meninges


โรคสำคัญ

Meningitis

สาเหตุสำคัญของ bacterial meningitis

ในวัยรุ่นและ young adults


Meningococcemia

ภาวะเชื้อเข้ากระแสเลือด


Fulminant sepsis

เกิด shock ได้รวดเร็วมาก


จุดเด่นของ Meningococcus

Capsule

มี capsule หนา

ช่วยหลบ phagocytosis


Endotoxin

LPS/LOS ปริมาณมาก

ทำให้เกิด

Massive cytokine release

       

DIC

       

Shock


อาการคลาสสิก

Fever

Headache

Neck stiffness

Petechial rash


Petechial rash

เป็น clue สำคัญ

Fever

+

Petechiae

คิดถึง meningococcemia

เสมอ


Waterhouse-Friderichsen syndrome

ภาวะแทรกซ้อนรุนแรง

Meningococcemia

     

DIC

     

Adrenal hemorrhage

     

Shock


Clinical pearl

ไข้สูง

  •  

petechiae

  •  

hypotension

=

Meningococcal sepsis จนกว่าจะพิสูจน์ว่าไม่ใช่


Neisseria gonorrhoeae

(Gonococcus)


Habitat

อยู่ใน

  • Cervix
  • Urethra
  • Rectum
  • Pharynx

ติดต่อทางเพศสัมพันธ์

เป็นหนึ่งใน STI ที่พบบ่อยที่สุด


Pathogenesis

Sexual transmission

      

Mucosal infection

      

Local inflammation


โรคสำคัญ

Urethritis

ชาย

อาการเด่น

Dysuria

+

Purulent discharge


Cervicitis

หญิง

อาจไม่มีอาการ


PID

Pelvic inflammatory disease


Epididymitis


Proctitis


Pharyngitis


Disseminated Gonococcal Infection (DGI)

เชื้อเข้ากระแสเลือด

เกิด

Tenosynovitis

Arthritis

Skin lesions


Septic arthritis

ในวัยหนุ่มสาวที่มีเพศสัมพันธ์

ต้องคิดถึง Gonorrhea เสมอ


ทำไม Gonococcus ไม่มี capsule

ต่างจาก meningococcus

เพราะโรคส่วนใหญ่เกิดเฉพาะที่ mucosa

ไม่ใช่ bloodstream pathogen หลัก


Pili

อาวุธสำคัญ

ช่วยเกาะ mucosa


Antigenic variation

เปลี่ยนผิวตัวเองได้เรื่อย ๆ

จึงติดซ้ำได้

และไม่มีวัคซีนที่มีประสิทธิภาพสูงเหมือน meningococcus


เปรียบเทียบ N. meningitidis และ N. gonorrhoeae

Feature

Meningitidis

Gonorrhoeae

Habitat

Nasopharynx

Genital tract

Transmission

Respiratory

Sexual

Capsule

Yes

No

Meningitis

++++

Rare

Septic shock

++++

Rare

STI

No

++++

Septic arthritis

+

+++

Vaccine

Yes

No


Moraxella catarrhalis

เชื้อ Gram-negative diplococcus อีกตัว


Habitat

Upper respiratory tract


โรคสำคัญ

  • Otitis media
  • Sinusitis
  • COPD exacerbation

ความสำคัญ

น้อยกว่า Neisseria มาก

แต่พบบ่อยในทางเดินหายใจ


Framework ที่ควรจำ

ให้คิดเป็น

Gram-negative cocci

       

        ├── Brain pathogen

              

          Meningococcus

       

        ├── STI pathogen

              

          Gonococcus

       

        └── Respiratory pathogen

               

            Moraxella


Clinical Approach

Fever + neck stiffness

คิด

N. meningitidis


Fever + petechial rash

คิด

Meningococcemia


Purulent urethral discharge

คิด

N. gonorrhoeae


Young adult + septic arthritis

คิด

Disseminated gonococcal infection


Child with otitis media

อาจพบ

Moraxella catarrhalis


Pathogenesis Summary

Gram-negative cocci ก่อโรคผ่าน 2 กลไกหลัก

Mucosal invasion

Mucosa

 

Local infection

เช่น

  • Gonorrhea
  • Moraxella

Bloodstream invasion

Nasopharynx

 

Blood

 

Meninges

เช่น

  • Meningococcus

Mind Map สรุป

Gram-negative cocci

├── Neisseria

     

      ├── N. meningitidis

            ├─ Capsule

            ├─ Meningitis

            ├─ Petechiae

            └─ Septic shock

     

      └── N. gonorrhoeae

             ├─ STI

             ├─ Urethritis

             ├─ PID

             ├─ Septic arthritis

             └─ Antigenic variation

└── Moraxella

       ├─ Otitis media

       ├─ Sinusitis

       └─ COPD exacerbation

สรุปจำง่ายที่สุด

  • N. meningitidis = เชื้อจาก nasopharynx ที่ชอบเข้ากระแสเลือดและเยื่อหุ้มสมอง
  • N. gonorrhoeae = เชื้อ STI ที่ชอบ mucosa ของระบบสืบพันธุ์
  • Moraxella = เชื้อทางเดินหายใจส่วนบน

ดังนั้นเมื่อเห็น Gram-negative diplococci ใต้กล้อง ให้ถามทันทีว่า

"ผู้ป่วยมี meningitis หรือมี STI ?"

เพราะคำตอบส่วนใหญ่มักจะอยู่ในสองโรคนี้ครับ.

 

Microbiology: Anaerobes overview

Microbiology: Anaerobes overview

เมื่อเรียน

  • Gram-positive cocci
  • Gram-negative bacilli
  • Gram-negative cocci

แล้ว กลุ่มที่นักศึกษาแพทย์มักสับสนมากที่สุดคือ

Anaerobes

เพราะไม่ได้แบ่งตาม Gram stain หรือรูปร่าง

แต่แบ่งตาม

ความสามารถในการใช้ออกซิเจน


Concept สำคัญที่สุด

ถ้าจำได้เพียงประโยคเดียว

Anaerobes คือเชื้อที่ชอบอยู่ในบริเวณที่ออกซิเจนต่ำ และมักก่อโรคเมื่อ normal barrier ถูกทำลาย


เชื้อแบ่งตามการใช้ออกซิเจน

Aerobe

ต้องการ O2

 

Facultative anaerobe

มีหรือไม่มี O2 ก็ได้

 

Anaerobe

ไม่ชอบ O2


ทำไมออกซิเจนถึงฆ่า Anaerobes ได้

เชื้อส่วนใหญ่มีเอนไซม์

  • Catalase
  • Superoxide dismutase

ใช้กำจัด free radicals


Anaerobes หลายชนิดไม่มี

ดังนั้น

O2

 

Reactive oxygen species

 

Cell damage

 

Death


Anaerobes อยู่ที่ไหนตามธรรมชาติ

คำตอบสำคัญมาก

เชื้อพวกนี้ไม่ได้มาจากสิ่งแวดล้อมเป็นหลัก

แต่เป็น

Normal flora ของร่างกาย


3 แหล่งใหญ่

ช่องปาก

Mouth

 

Anaerobes จำนวนมาก


ลำไส้

Colon

 

Anaerobes มากที่สุดในร่างกาย


Female genital tract


Concept ที่ต้องเข้าใจ

Anaerobes ไม่ค่อยก่อโรคในคนปกติ

แต่เมื่อ barrier แตก

จะเกิดโรคทันที


ตัวอย่าง

ฟันผุ

Oral flora

 

Dental infection

 

Abscess


ไส้ติ่งแตก

Colon flora

 

Peritoneum

 

Peritonitis


Anaerobes ที่สำคัญ

จริง ๆ มีหลายร้อยชนิด

แต่ที่ควรรู้มีไม่กี่ตัว


1. Bacteroides

ตัวสำคัญที่สุด

โดยเฉพาะ

Bacteroides fragilis


Habitat

Colon


Clinical importance

เชื้อ anaerobe ที่พบบ่อยที่สุดในการติดเชื้อช่องท้อง


พบใน

  • Appendicitis rupture
  • Diverticulitis
  • Peritonitis
  • Intra-abdominal abscess

จุดเด่น

มี capsule

จึงสร้าง abscess ได้เก่ง


Clinical pearl

Intra-abdominal abscess

คิดถึง

Bacteroides fragilis

เสมอ


2. Prevotella และ Fusobacterium

อยู่ใน

  • Mouth
  • Oropharynx

ก่อโรค

  • Dental abscess
  • Periodontal disease
  • Aspiration pneumonia

Fusobacterium necrophorum

สำคัญมากในคนอายุน้อย


ทำให้

Lemierre syndrome

Pharyngitis

 

Internal jugular vein thrombosis

 

Septic emboli


3. Clostridium

ต่างจาก anaerobe ตัวอื่น

เพราะอยู่ในสิ่งแวดล้อมด้วย


จุดเด่น

สร้าง spore

Stress

 

Spore

 

Survive


Clostridium perfringens

ก่อ

Gas gangrene


Pathogenesis

Trauma

 

Deep tissue injury

 

Low oxygen

 

Clostridium growth

 

Myonecrosis


Clostridium tetani

ก่อ

Tetanus


เชื้อไม่ได้ทำลายเนื้อเยื่อมาก

แต่ toxin อันตราย


Tetanospasmin

ยับยั้ง

  • GABA
  • Glycine

กล้ามเนื้อเกร็ง


Clostridium botulinum

ก่อ

Botulism


Botulinum toxin

ยับยั้ง acetylcholine

Flaccid paralysis


Clostridioides difficile

(เดิมชื่อ Clostridium difficile)


พบใน colon


ปกติ flora อื่นคอยกดไว้


เมื่อให้ antibiotic

Antibiotic

 

Normal flora ลด

 

C. difficile โต

 

Toxin

 

Colitis


Pseudomembranous colitis

โรคคลาสสิก


Pathogenesis ของ Anaerobic Infection

กลไกเกิดโรคคล้ายกันเกือบทั้งหมด


Step 1

Normal flora


Step 2

Barrier injury


Step 3

Anaerobes หลุดเข้าลึก


Step 4

Low oxygen environment


Step 5

Abscess formation


ภาพรวม

Normal flora

     

Barrier breakdown

     

Low oxygen tissue

     

Anaerobic growth

     

Abscess


ทำไม Anaerobes ชอบสร้าง Abscess

เพราะ

1.       ออกซิเจนต่ำ

2.       Neutrophil ใช้ออกซิเจนจนยิ่งต่ำ

3.       เชื้อเจริญได้ดี


จึงเกิดวงจร

Infection

 

Inflammation

 

Low oxygen

 

More anaerobes

 

Abscess


Anaerobes และ Aspiration Pneumonia

เรื่องนี้ออกสอบบ่อย


เมื่อสำลัก

Oral anaerobes

 

Lung

 

Aspiration pneumonia


พบใน

  • Alcoholism
  • Stroke
  • Dementia
  • Reduced consciousness

Clue ที่บอกว่าอาจเป็น Anaerobe

1. หนอง

Abscess

 

Anaerobes ?


2. กลิ่นเหม็น

Foul-smelling discharge


3. เนื้อตาย

Necrosis


4. Gas ในเนื้อเยื่อ

Gas-forming infection


5. Infection ใกล้ mucosal surface

  • Mouth
  • GI tract
  • Female genital tract

เปรียบเทียบเชื้อสำคัญ

Organism

Habitat

Disease

Bacteroides fragilis

Colon

Intra-abdominal abscess

Prevotella

Mouth

Dental abscess

Fusobacterium

Oropharynx

Lemierre syndrome

C. perfringens

Soil/GI

Gas gangrene

C. tetani

Soil

Tetanus

C. botulinum

Soil/Food

Botulism

C. difficile

Colon

Antibiotic-associated colitis


Framework สำหรับนักศึกษาแพทย์

ให้คิดเป็น 2 กลุ่ม

Anaerobes

    

     ├── Normal flora anaerobes

          

           ├─ Bacteroides

           ├─ Prevotella

           └─ Fusobacterium

    

     └── Clostridia

           

            ├─ Perfringens

            ├─ Tetani

            ├─ Botulinum

            └─ Difficile


Clinical Approach

Brain abscess

คิด

Oral anaerobes


Lung abscess

คิด

Aspiration

+

Anaerobes


Ruptured appendix

คิด

Bacteroides fragilis


Crepitus + muscle necrosis

คิด

Clostridium perfringens


Lockjaw

คิด

Tetanus


Descending paralysis

คิด

Botulism


Diarrhea หลัง antibiotic

คิด

C. difficile


Mind Map สรุป

Anaerobes

├── Oral flora

      ├─ Prevotella

      └─ Fusobacterium

├── Colon flora

      └─ Bacteroides fragilis

├── Abscess formation

      ├─ Brain abscess

      ├─ Lung abscess

      └─ Intra-abdominal abscess

└── Clostridia

       ├─ C. perfringens Gas gangrene

       ├─ C. tetani Tetanus

       ├─ C. botulinum Botulism

       └─ C. difficile Colitis

สรุปจำง่ายที่สุด

ให้จำประโยคนี้

Anaerobes คือเชื้อประจำช่องปากและลำไส้ที่ชอบบริเวณออกซิเจนต่ำ เมื่อ barrier ถูกทำลายจะก่อ abscess, necrosis และ foul-smelling infection ส่วน Clostridia เป็นกลุ่มพิเศษที่สร้าง toxin รุนแรงได้

ถ้าเข้าใจประโยคนี้ จะเชื่อมโยงโรคส่วนใหญ่ของ anaerobes ได้เกือบทั้งหมดก่อนลงรายละเอียดเชิงลึกในแต่ละชนิดต่อไป